RESUMO
En el tejido pulmonar de modelos murinos, la angiotensina II induce la proliferación de fibroblastos, su diferenciación a miofibroblastos y la producción de procolágeno tras su unión al receptor I de la angiotensina. Hemos estudiado el comportamiento de fibroblastos pulmonares humanos procedentes de una línea celular comercial tras la estimulación con TGF-β1. Hemos observado que estos fibroblastos, cuando son estimulados, aumentan la expresión de bFGF, colágeno y α-SMA. Tras el bloqueo del receptor de Angiotensina II con Losartan a una concentración de 10 µM y la estimulación con TGF- β1, se produce una disminución, tanto de los niveles de bFGF como de la concentración de colágeno, sin que llegue a alcanzar la significación estadística con respecto a las células no tratadas. En cuanto a la expresión de α-SMA como marcador de transformación a miofibroblastos, no había diferencias entre las células tratadas con TGF-β1 y TGF-β1 más losartán
In murine model lung tissue, angiotensin II induces the proliferation of fibroblasts, their distinction from myofibroblasts and procollagen production after its binding with the type 1 receptor. We have studied the behavior of human lung fibroblasts from a commercial cell line after stimulation with TGF-β1. We observed that those fibroblasts, when stimulated, increased bFGF, collagen and α-SMA expression. After blocking the angiotensin II receptor with losartan at a concentration of 10 µM and stimulation with TGF- β1, there was a decrease in both bFGF levels and collagen concentration, without reaching statistical significance with regard to untreated cells. With regard to α-SMA expression as an indicator of transformation to myofibroblasts, there were no differences between cells treated with TGF-β1 and TGF-β1 with losartan
Assuntos
Humanos , Fibroblastos/citologia , Fibrose Pulmonar Idiopática/fisiopatologia , Angiotensina II , Modelos Animais , Fator de Crescimento Transformador betaRESUMO
Objetivo: Establecer cuál es la dosis de TGF-β1 más adecuada para la estimulación de cultivos de fibroblastos pulmonares humanos y el tiempo necesario de incubación de los mismos para obtener la máxima respuesta. Material y métodos: Diseñamos un estudio de dosis respuesta con TGF-β1 sobre una línea celular de fibroblastos pulmonares humanos. Analizamos la producción de factor básico de crecimiento de fibroblastos (b-FGF) como marcador de estímulo fibrogénico. Para ello se cultivaron fibroblastos humanos procedentes de una línea celular (MRC5) obtenida de la ECCC (European Collection of Cell Culture, UK). Las células se cultivaron en placas de 33cm2, cuando estuvieron confluentes se les estimuló con diferentes dosis de TGF-β1 (Peprotech, USA): 5, 10 ng/ml. Las células se incubaron durante 12, 24, 48 y 72 horas. Se usaron como control células no estimuladas con TGF-β1. Los niveles de factor básico de crecimiento de fibroblastos (b-FGF) se midieron por ELISA (R&D System, Minneapolis, MN). Se analizó la viabilidad celular mediante Azul Trypan a las 24, 48 y 72 horas de la estimulación con TGF-β1. Resultados: La mayor producción de b-FGF se produjo a las 24 horas tras la estimulación con la dosis de 10 ng/ml de TGF-β1, siendo la producción de b-FGF igual a 501 pg/ml. La viabilidad celular tiene su mayor valor a las 48 horas, disminuyendo en horas sucesivas, alcanzando los niveles más bajos a las 72 horas. Conclusiones: Existe un efecto estimulador del TGF-β1 sobre los fibroblastos pulmonares humanos in vitro. Esta acción del TGF-β1 es dosis dependiente y alcanza el nivel máximo de proliferación con la dosis de 10 ng/ml a las 24 horas de su tratamiento (AU)
Objective: To establish the most appropriate dose of TGF-β1 to stimulate human lung fibroblasts cultures and their necessary incubation time to obtain the maximum response. Material and methods: A dose response study was designed with TGF - β1 based on human lung fibroblast cells. The production of basic fibroblast growth factor (b-FGF) was analyzed as a marker for fibrogenic stimulus. Human fibroblasts from a cell line (MRC5) were obtained from the ECCC (European Collection of Cell Culture, UK) and cultivated. Cells were cultured on 33 cm2 plates; once confluent, they were stimulated with various doses of TGF - β1 (Peprotech, USA): 5, 10 ng/ml. The cells were incubated for 12, 24, 48 and 72 hours. Cells not stimulated with TGF - β1 were used as a control. The levels of basic fibroblast growth factor (b-FGF) were measured using ELISA (R&D System, Minneapolis, MN). Cell viability was analyzed using Trypan Blue at 24, 48 and 72 hours following the stimulation with TGF - β1. Results: The greatest production of b-FGF took place 24 hours after the stimulation with the dose of 10ng/ml of TGF - β1, with the production of b-FGF being equal to 501 pg/ml. The cell viability reached its greatest value at the 48 hours, decreasing in the hours thereafter, to reach the lowest levels at 72 hours. Conclusions: TGF-β1 has a stimulating effect on human lugn fibroblasts in vitro. This action of the TGF - β1 is dose dependent and reaches maximum proliferation levels with a dose of 10ng/ml 24 hours following treatment (AU)
Assuntos
Humanos , Fator 2 de Crescimento de Fibroblastos , Fator de Crescimento Transformador beta1/farmacocinética , Fibrose Pulmonar Idiopática/tratamento farmacológico , Relação Dose-Resposta a DrogaRESUMO
El mesotelioma pleural maligno (MPM) es un tumor agresivo que surge del epitelio pleural. Se han detectado concentraciones aumentadas de proteínas solubles relacionadas con la mesotelina (SMRP) en suero de pacientes con MPM (..) (AU)
Malignant pleural mesothelioma (MPM) is an aggressive tumour that arises from pleural epithelium. Increased concentrations of soluble mesothelin related proteins (SMRP)
